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    2. 文章詳情

      動物抑郁行為實驗手冊丨大小鼠強迫游泳實驗測試方法與指標評價

      日期:2022-04-09 01:12
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      摘要:強迫游泳測試使用一個高 25至 50厘米、直徑10至 30厘米的圓柱形水箱來容納嚙齒動物和小型靈長類動物。水箱中充滿室溫水,以防止對象將其爪子或尾巴接觸到圓柱體的地板并防止逃跑。不透明的分隔器通常在水箱內使用,以允許多個受試者進行測試。

      實驗儀器

      強迫游泳測試使用一個高 25至 50厘米、直徑10至 30厘米的圓柱形水箱來容納嚙齒動物和小型靈長類動物。水箱中充滿室溫水,以防止對象將其爪子或尾巴接觸到圓柱體的地板并防止逃跑。不透明的分隔器通常在水箱內使用,以允許多個受試者進行測試。

      雖然可以進行實時評分,但建議使用視頻和跟蹤軟件,例如VisuTrack動物行為分析軟件(上海欣軟),以避免評分不準確和差異。坦克必須有足夠的照明以提高記錄質量,并且可以使用白噪聲發生器來掩蓋可能影響主體表現的任何噪聲。


      實驗方法

      (1)實驗前調節測試箱內水溫,水溫應為 23 ~25℃ 。水深應根據動物體重進行調整,動物尾巴與測試箱底面保持一定距離。

      (2)如同時進行多只動物實驗,每兩只動物間應用不透明擋板隔開。

      (3) 大鼠強迫游泳實驗,應在實驗前1d預游,24h后進行強迫游泳實驗。記錄 5min內動物的不動時間、游泳時間及攀爬時間。

      (4)小鼠強迫游泳實驗,應在檢測當天進行,小鼠游泳時間應為6min,記錄后 4min的游泳時間、不動時間及攀爬時間。


      評價指標

      評價指標應采用動物不動、攀爬、游泳三類動作的時間及次數進行判定。

      (1)不動( immobility):動物在水中停止掙扎,呈漂浮狀態,僅有輕微的肢體運動以保持頭部浮在水面。不動時間越長表明抑郁程度越重。正常小鼠不動時間在檢測時間的 40% ~ 80%內;正常大鼠不動時間在檢測時間的 30% ~ 70%內;抑郁行為判斷標準:不動時間與對照組相比顯著性增加(P<0. 05)。

      (2)游泳(swimming):動物進行流暢、協調的運動,動物四肢始終在水面以下。游泳時間和游泳距離越少,表明抑郁程度越重。

      (3)攀爬( climbing):動物四肢強有力伸出水面,并沿測試箱壁做劇烈的上下動作。5min檢測期內,SD 大鼠攀爬時間 60 ~ 130s。攀爬時間越少,表明動物抑郁程度越重。

      注意事項

      • 不同種系實驗動物在 FST中表現不一樣。瑞士小鼠對 作用于 5 -HT/NE神經遞質系統的抗抑郁藥品zui敏感, 而抗抑郁藥品對 DBA/2 小鼠無行為學效應, C57BL/6JRj品系小 鼠是唯1對安非他酮敏感的小鼠 。說明要做到研究結果的可比性, 必須選擇相同種系的實驗動物。

      • 盡管實驗用鼠品種相似, 使用客觀評價標準, 實驗動物 在 FST中表現仍有差異。

      • 實驗室內部標準與條件, 包括飼養條件、光照時間對研究結果都有影響。

      • 在 FST中, 實驗動物行為會受到水溫影響, 在冷水中容易出現靜止不動行為;相反, 在溫度較高水中不動行為出現較晚。所以通常將水溫設定在 23 ~ 25℃。

      • 水桶內水的高度應當盡量保證實驗動物的后肢不能支撐或者接觸到水桶底部

      • 計算動物絕望狀態的行為,通常以動物的后肢是否活動為判斷依據

      • 實驗時間不能太長,通常建議大鼠6min,小鼠5min左右

      要點概括

      • 強迫游泳測試是由 Roger D. Porsolt 在 1970 年代后期開發的,作為一項簡單的任務,用于評估和評估小動物中藥品和化合物的抗抑郁特性。

      • 該任務也被稱為行為絕望或習得性無助任務,因為受試者成為表示絕望的固定體。

      • 該任務使用一個裝滿水的圓柱形水箱,這樣當對象被放入其中時,它無法到達地板或逃離水箱。

      • 不動包括平衡身體和保持頭部高于水面所需的任何行為。

      • 時間采樣技術將行為分為兩種類型:攀爬和游泳。這種技術提供了一種方便的方法來量化逃逸行為。

      • 當用抗抑郁藥和其他化合物治liao時,不動行為會降低。

      歡迎關注動物神經學與與行為學公眾號bioviewer,實驗相關可添加微信咨詢--劉工18221718071


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