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    2. 新聞詳情
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      Y型水迷宮

      日期:2022-06-03 10:01
      瀏覽次數:3556
      摘要:
      鉛是一種神經發育毒物,它對神經細胞的正常發育以及神經遞質的正常分泌產生影響和損害[1],故而,進一步影響學習和記憶能力。海爾??诜菏俏以貉兄粕a的保健口服液,已初步證明了其有明顯升高鉛中毒小鼠Hb含量、降低ALT活性等作用[2]。為了進一步研究海爾??诜簩︺U中毒所致小鼠記憶障礙的影響作用并分析其機制,我們曾用復雜迷宮趨食法測定小鼠記憶障礙的改善情況,結果較理想,為進一步驗證其療效,本文用Y型水迷宮測定小鼠的逃避潛伏期和平均逃避達標率。有報道鉛中毒者血鉛與血鋅水平呈負相關,認為糾正缺鋅狀態是減少腸道對鉛吸收的重要措施[3],因此,我們嘗試用鋅**鉛中毒小鼠,觀察其改善記憶障礙的作用,并分析鋅與海爾??诜涸?*鉛染毒所致小鼠記憶障礙中的作用關系。
      1 資料與方法
      1.1  實驗動物 昆明種健康雄性小鼠60只,鼠齡35天,平均體重20g。由右江民族醫學院動物室(合格)提供。
      1.2試劑 醋酸鉛為國產分析純;海爾??诜海ㄓ摄y花、茯苓、甘草等中藥,經水提取、乙醇沉淀等流程制成)由本院海爾福研制中心提供;葡萄糖酸鋅口服液由哈藥集團三精制藥有限公司生產(批號:05040331)。
      1.3 Y型水迷宮測定方法  Y型水迷宮是測定小鼠辨別性記憶的*簡單*常用的方法,該裝置分長臂端和兩分枝短臂端。長臂端長40cm , 寬15 cm,短臂端長30cm, 寬15 cm。長、短臂高均為20 cm。左側短臂裝有平臺,供小鼠棲身,右側短臂用木板蓋上,作為暗道,水深10cm,水溫(28±0.5)℃。。實驗時將小鼠尾對叉路從長臂端輕輕放入水中,以其在10s內直接抵達平臺為正確反應。小鼠抵達平臺休息15s再重復訓練,每天訓練10次,連續5天,以每組平均正確反應率和抵達平臺所需時間(逃避潛伏期)作為評價記憶的指標[4],逃避潛伏期若超過10s則以10記錄。
      1.4 動物染毒和**方法   60小鼠隨機分成5組:鋅**組、鋅加海爾福**組、海爾福**組、單純染鉛組、陰性對照組。除陰性對照組外,其余4組均用2g/L的醋酸鉛水溶液,按每克體重0.007ml劑量作腹腔注射染毒,每天1次,連續35天;陰性對照組用等體積的生理鹽水腹腔注射。染毒14天后,鋅**組用葡萄糖酸鋅水溶液灌胃,劑量按每只鼠0.02mg,每天1次;海爾福**組用海爾??诜?,劑量為每鼠0.1ml,用蒸餾水稀釋1倍后灌胃,鋅加海爾福**組用葡萄糖酸鋅加海爾??诜夯旌虾蠊辔?,劑量與鋅**組和海爾福**組相同;單純染鉛組和陰性對照組用等體積的蒸餾水灌胃,每天1次,直至實驗結束。
      1.5 統計學分析    用SPSS 10.0 統計軟件包,進行方差分析。
      2. 結果
      2.1逃避潛伏期比較 單純染鉛組的逃避潛伏期長,與其他4組比較差異有顯著性(p<0.01和p<0.05)。海爾福**組和鋅**組的逃避潛伏期比鋅加海爾福**組為短,差異有顯著性(p<0.05)。從測試第1天到第5天,各組的逃避潛伏期以第1天*長,然后逐漸縮短,差異有顯著性(p<0.01)。見表1。
               表1  各組小鼠用Y型水迷宮所測的逃避潛伏期比較(X±S,S)                                                        
                        第1天       第2天    第3天     第4天    第天     合計
      鋅**組          4.82±0.72    3.92±0.51   3.25±0.48 3.15±0.80   2.78±0.80  3.66±0.98Δ*
      鋅加海爾福**組  5.30 ±1.32   4.28±1.38   3.86±1.08  3.56±1.31  3.24±0.62   4.10±1.32#
      海爾福**組     5.,Δ*
      合計             5.45 ±1.29    4.18±0.89 3.43±1.00  3.27±0.943.28±1.02
      注:與單純染鉛組比較,Δp<0.01,#p<0.05;與鋅加海爾福**組比較,*p<0.05;與第1天比較,p<0.01。
      2.2 平均逃避達標率比較 鋅加海爾福**組和單純染鉛組的平均逃避達標率較其他3組低,鋅**組與單純染鉛組比較,差異有顯著性(p<0.05)。從第1天到第5天,各組平均逃避達標率總體上逐漸提高。見表2。
                    表 2  各組小鼠用Y型水迷宮所測的平均逃避達標率比較(X±s)
                            第1天     第2天    第3天    第4天       第5天        合計
      鋅**組        83.85±0.07  90.63±0.06   95.01±0.05  98.10±0.04    97.15±0.04  94.20±0.06#
      鋅加海爾福**組 77.55±0.15  90.55±0.06  90.25±0.10   96.12±0.05   95.15±0.12  89.05±0.11
      海爾福**組     73.23±0.19 88.35±0.08   96.15±0.05  100.00±0.00   97.38±0.05   91.27±0.13
      單純染鉛組      77.35±0.15  88.25±0.13   90.44±0.06  92.23±0.08    96.36±0.05  88.15±0.11
      陰性對照組      75.16±0.19  91.28±0.07   96.24±0.08  98.74±0.04    98.80±0.04  92.70±0.15
      合計            79.46± 0.17  90.46±0.06 93.33±0.08  97.25±0.05  96.36±0.06  
      注:與單純染鉛組比較,#p<0.05;與第1天比較,p<0.01。
      3. 討論
      本實驗用Y型水迷宮測定小鼠的記憶能力,鋅**組和海爾福**組的逃避潛伏期比單純染鉛組短,平均逃避達標率提高,說明海爾??诜汉推咸烟撬徜\均對鉛中毒所致小鼠的記憶障礙有一定改善作用,效果較好。鋅具有很強的誘導金屬硫蛋白(MT)作用,MT與鉛結合可使鉛失去毒性[5];鋅還能拮抗鉛對ALAD的抑制作用。本實驗結果與此報道一致。海爾??诜菏怯摄y花、茯苓、甘草等中藥提煉而成,其中的茯苓等有較強抗氧化作用。而鉛致腦組織脂質過氧化是引起神經行為改變的生物學基礎之一[6],故較強的抗氧化成分可能是海爾??诜?*鉛中毒所致小鼠的記憶障礙的原因之一,其機制有待進一步研究。
      各組平均逃避達標率比較,差異不大,僅鋅**組同單純染鉛組比較,差異有顯著性。原因可能為實驗時間較短,鉛中毒小鼠的辨別性記憶損害尚不明顯,表現為平均逃避達標率的雖有提高,但各組間差異不顯著。
      在實驗結果中我們發現,鋅加海爾福**組對鉛中毒所致小鼠的記憶障礙有一定改善作用,但同鋅**組和海爾福**組的**效果比較,逃避潛伏期延長,平均逃避達標率降低,提示海爾??诜汉推咸烟撬徜\在**鉛中毒所致小鼠的記憶障礙上可能有一定拮抗作用,其機制不詳,有待進一步研究。

      滬公網安備 31011202007432號

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